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目的 :探讨癌基因HER2、mdm 2和C myc扩增与胃癌恶性程度、转移及预后的关系。 方法 :用差异竞争性多聚酶链反应检测胃癌原发灶、癌旁、转移淋巴结及远处脏器转移癌中HER2、mdm 2和C myc的基因变异。结果 :HER2扩增频率在近端胃癌组中明显高于远端胃癌组 (分别是 11/ 13和 5 / 19,P <0 .0 0 5 ) ,侵及浆膜组明显高于未侵及浆膜组 (12 / 18和 4/ 14,P <0 .0 5 )。mdm 2的扩增频率在转移淋巴结中高于胃原发癌 (12 / 2 1和 12 / 32 ,P>0 .0 5 ) ,在 3例淋巴结微转移灶中发现mdm 2扩增。C myc在胃癌原发灶及转移淋巴结中的扩增频率分别是6 / 32和 5 / 2 1,2例远处脏器转移癌中有扩增。结论 :HER2、mdm 2和C myc基因扩增与胃癌的快速生长有关 ,三者联合检测可能为判断胃癌恶性程度、转移及预后提供有价值的信息。 相似文献
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抗人胃癌3H11人-鼠嵌合抗体的构建及表达 总被引:6,自引:0,他引:6
为了降低抗人胃癌鼠单抗3H11的免疫原性,以利于该单抗在临床中的应用。我们构建并表达了3H11的人-鼠嵌合抗体,将3H11的轻、重链可变区基因分别插入到含有人k链及IgGl重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,构建了3H11人-鼠嵌合抗体轻、重链表达载体。应用Lipofectin方法先将嵌合轻链表达载体转染到Sp2/0细胞中,经用含霉酚酸的选择培养基筛选及克隆化培养,获得稳定分泌3H11人-鼠嵌合轻链的转染细胞株。再将嵌合重链表达载体转染该细胞系,用含有组氨醇的选择培养基筛选,获得组氨醇抗性细胞株,经亚克隆后得到可稳定分泌人k链和人IgGl的转染细胞系,经ELISA检测该细胞系所分泌的上清含有可与人胃癌细胞系803结合的人IgG抗体活性,RT-PCR结果显示该细胞株有人-鼠嵌合抗体mRNA的转录,证明已获得分泌3H11人-鼠嵌合抗体的细胞系。 相似文献
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抗血管内皮细胞生长因子受体单抗的制备及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:制备血管内皮细胞生长因子受体(kinaseinsertdomaincontainingreceptor,KDR)的单克隆抗体并鉴定其特异性。方法:在大肠杆菌中表达重组KDR融合蛋白。融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养。单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛和SP免疫组化筛选并鉴定其亚类。结果:经ELISA双筛和组化筛选获得了一株能稳定分泌人KDR单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为SSW2),其分泌抗体亚类为IgG1,产生的腹水效价可达1×10-6。结论:SSW2同血管内皮细胞尤其是肿瘤组织的血管内皮细胞有较强的阳性反应。 相似文献
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以质粒为载体的小片段DNA做荧光原位杂交进行基因定位及检测 总被引:3,自引:1,他引:2
目的 建立以质粒为载体小片段DNA的荧光原位杂交(FISH)基因定位及检测方法。方法 采用切口平移法以载有目的基因的质粒直接标记生物素制成探针,用FISH法于外周血淋巴细胞中期分裂相定位新基因1A6在卵巢癌和胃癌细胞株上检测癌基因c-met,c-erbB2,1A6和抑癌基因APC,Rb。结果 新基因1A6初步定位于C组某一染色体长臂远端,上述癌基因,抑癌基因在卵巢癌和胃癌细胞株中的获得清晰的杂交信 相似文献
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目的观察连黛胶囊防治胃癌的药理活性与临床疗效方法采用MNNG诱发胃癌大鼠进行药理实验,基因蛋白表达用免疫组化法检测,细胞分子药理采用甲基绿-派诺宁染色、吖啶橙染色、原位末端标记、琼脂凝胶电泳、免疫组化、MTT、流式细胞仪分析、615近交系小鼠皮下成瘤等方法进行,药理基因差异条带检测采用mRNA差异显示法,临床观察随机单盲设计结果试药灌胃使大鼠胃癌发生率明显降低,使p21ras和c-erbB2表达阴性(对照组阳性).试药血清可抑制MGC-803细胞生长和诱导细胞凋亡.盐酸小檗碱(试药的主要有效成分)可使SGC-7901和MGC-803细胞软琼脂集落形成率降低,增殖抑制及移植成瘤率降低;能抑制MGC-803细胞生长,诱导细胞凋亡,使bcl-2弱阳性表达;能抑制BGC-823细胞生长,并出现基因差异显示条带.临床观察31例胃肠癌患者,服药1mo能改善证候,提高生存质量,提高NK细胞和CD3水平.结论连黛胶囊具有防治胃癌的功效,作用机制与抑制癌基因蛋白过表达和诱导癌细胞凋亡有关,有药理作用靶基因存在. 相似文献
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目的:探讨复方中药白龙对人胃癌BGC82-3G1期细胞周期蛋白激酶抑制因子(CKI)p16^INK4a,p21以及Rb,c-myc等基因转录的影响和cAMP-PKA信号通路的调节关系。方法:通过实验室常规分子生物学手段(细胞同步化,分子杂交-Northern杂交,Western杂交等)检测相关基因的表达变化。 相似文献
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猪苓多糖对小鼠NK,LAK活性的影响 总被引:13,自引:0,他引:13
猪苓多糖2mg/只,rIL—2 5×1~4U/只,腹腔注射C57BL/6小鼠,连续9天,能明显抑制小鼠皮下移植性B16恶性黑色素瘤的生长,与对照组及单用rIL—2组比较有显著性差异(P<0.05~0.01)。~3H—TdR掺入法检测小鼠脾细胞NK及内源性LAK活性,发现只有猪苓多糖 rIL—2组的NK及内源性LAK活性提高显著(P<0.05),其它单用猪苓多糖与rIL—2两组的NK及内源性LAK活性增加不显著(P>0.05)。说明猪苓多糖与rIL—2有协同作用,猪苓多糖可作为生物反应调节剂(BRM),用于LAK/rIL—2为主的肿瘤生物学疗法。 相似文献
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